1.安瓿管準(zhǔn)備

　　安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安部管時(shí)，先用2%鹽酸浸泡過夜，自來(lái)水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性，干后、貼上標(biāo)簽，標(biāo)上菌號(hào)及時(shí)間，加入脫脂棉塞后，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用。

　　2.保護(hù)劑的選擇和準(zhǔn)備

　　保護(hù)劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護(hù)劑時(shí)，應(yīng)注意其濃度及 pH值，以及滅菌方法。如血清，可用過濾滅菌;牛奶要先脫脂，用離心方法去除上層油脂，一般在100℃間歇煮沸2-3次，每次10-30分鐘，備用。

　　3.凍干樣品的準(zhǔn)備

　　在最適宜的培養(yǎng)條件下將菌種培養(yǎng)至靜止期或成熟期，進(jìn)行純度檢查后，與保護(hù)劑混合均勻，分裝。微生物培養(yǎng)物濃度以細(xì)胞或孢子不少于 108-1010個(gè)ml為宜(以大腸桿菌為例，為了取得每毫升1010個(gè)活細(xì)胞菌液2毫升-2.5毫升，只需10毫升瓊脂斜面兩支)。

　　4.預(yù)凍

　　般預(yù)凍2小時(shí)以上，溫度達(dá)到-20℃到-35℃左右。

　　5.冷凍干燥

　　采用冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥。

　　將冷凍后的樣品安部管置于冷凍干燥機(jī)的干燥箱內(nèi)，開始冷凍干燥，時(shí)間一般為8-20小時(shí)。