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固相膜雜交|本底的排除
發(fā)布日期:2006-07-06
“噪音”(noise)是固相膜雜交方法常遇到的問題,指標記DNA結合到空白膜上的放射性計數(shù),即本底。這個問題的克服一是使用高純度的核酸制品和充分嚴格的雜交條件:二是選擇合適的雜交反應液和對膜進行處理。研究發(fā)現(xiàn),隨著離子強度的增加,空白膜(未固定DNA對照膜)上的“噪音”水平增加,而在50%甲酚胺6×SSC的雜交反應液中充分封閉膜上的多余非特異結合位點。
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