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平板凝集反應

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-27

材料與試劑

以布氏桿菌病平板凝集反應為例。

1.玻璃板、刻度吸管等。

2.布氏桿菌平板凝集抗原、布氏桿菌標準陽性血清。

操作方法

1.取潔凈玻板一塊,用玻璃鉛筆劃成方格,并注明待檢血清號碼。

2.。.ml吸管分別吸取0.08ml0.04ml、0.02ml0.01ml各放入一方格內。大規模檢驗時,可只做2個血清量,大動物用0.04ml0.02ml,中小動物用0.08ml0.04ml。每檢一個樣品需換一只吸管。

3.每格內加布氏桿菌平板凝集抗原0.03ml,滴在血清附近,而不要與血清接觸。用牙簽(或火柴桿)自血清量最小的一格起,將血清與抗原混勻,每份血清用一根牙簽。

4.混合完畢,將玻板置凝集反應箱上均勻加溫或采用別的辦法適當加溫,使溫度達到30℃左右。3min5min內記錄結果。

結果判定

++++:出現大的凝集塊,液體完全清亮透明,即100%凝集。

+++。河忻黠@的凝集片,液體幾乎完全透明,即75%凝集。

++  :有可見的凝集片,液體不甚透明,即50%凝集。

+   :液體混濁,有小的顆粒狀物,即25%的凝集。

-  。阂后w均勻混濁,即不凝集。

以出現++凝集的血清最高稀釋倍數作為該份血清的凝集價。大動物(牛、馬、駱駝等)以0.02ml出現凝集價判為布氏桿菌病血清陽性,0.04ml出現凝集價判為可疑。中小動物(豬、山羊、綿羊等)以0.04ml出現凝集價判為該份血清為布氏桿菌病陽性血清,0.08ml出現凝集價判為可疑。

注意事項

1.每次試驗必須以標準陽性血清和標準陰性血清進行對照。

2.加抗原前必須搖勻。

3.反應溫度最好保證在30左右,3min5min內判定。如反應溫度偏低,可適當延

長判讀時間。

4.如用兩個血清量作試驗,任何一個血清量出現凝集反應時,則需要用四個血清量重檢。

5.平板凝集反應最好是用于初篩,如出現陽性或可疑反應,再用試管凝集反應進行復檢,以定性。

6.平板凝集反應與試管凝集反應的關系。

表 平板凝集反應與試管凝集反應的關系

凝集

0.08

0.04

0.02

0.01

試管凝集反應

125

150

1100

1200

 

 
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