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菌落總數操作注意細節

放大字體  縮小字體 發布日期:2023-12-26
核心提示: 1 菌落總數是比較常規的微生物檢測項目,也是比較容易做的一個微生物檢測方法,主要注意無菌操作,與稀釋液均勻性。 
 1 菌落總數是比較常規的微生物檢測項目,也是比較容易做的一個微生物檢測方法,主要注意無菌操作,與稀釋液均勻性。

 

2 在空白出現菌落的時候需要去分析哪一步出現問題,人機料法環。當然空白出現菌落的時候,那么該批次的菌落總數數據都作廢處理。在制樣和做樣的時候需要在百級的環境(百級的潔凈工作臺)下進行。

 

3 稀釋液的均勻性,這個會影響結果,剛開始的時候可能會造成同一梯度的兩個結果相差有點遠,這個是因為做的時候沒有把稀釋液均勻。如果前后兩個梯度沒有梯度性,那么就是在做稀釋做不好。這個都是靠多做,技術才會提高。(當然還有一種情況,樣品是中添加了抑菌物質,這樣沒有梯度性。)

計數

 

1  可用肉眼觀察,必要時用放大鏡或菌落計數器,記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。菌落計數以菌落形成單位(colony-formingunits , CFU )表示。

 

2  選取菌落數在 30CFU~300CFU 之間、無蔓延菌落生長的平板計數菌落總數。低于 30CFU的平板記錄具體菌落數,大于 300CFU 的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數應采用兩個平板的平均數。

 

3  其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數;若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2,代表一個平板菌落數。(這個是很多新手會問的一個問題)

 

4  當平板上出現菌落間無明顯界線的鏈狀生長時,則將每條單鏈作為一個菌落計數。

 

計數(標準中介紹)

1  若只有一個稀釋度平板上的菌落數在適宜計數范圍內,計算兩個平板菌落數的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數,作為每 g ( mL )樣品中菌落總數結果。

 

2  若有兩個連續稀釋度的平板菌落數在適宜計數范圍內時,按式( 1 )計算:

3  若所有稀釋度的平板上菌落數均大于 300CFU,則對稀釋度最高的平板進行計數,其他平板可記錄為多不可計,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。

 

4  若所有稀釋度的平板菌落數均小于 30CFU,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

 

5  若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長,則以小于 1 乘以最低稀釋倍數計算。

 

6  若所有稀釋度的平板菌落數均不在 30CFU~300CFU 之間,其中一部分小于 30CFU 或大于300CFU 時,則以最接近 30CFU 或 300CFU 的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

編輯:songjiajie2010

 
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